白酒中甲醇的快速檢測方法

2024-10-23 09:11 杰凈

白酒中甲醇的快速檢測

1 范圍

本方法規(guī)定了白酒中甲醇的快速檢測方法。

本方法第一法適用于白酒（酒精度18% vol～68% vol）中甲醇的快速檢測，第二法適用于白酒（酒精度34% vol～68% vol）中甲醇的快速檢測。

第一法變色酸法

2 原理

樣品中的甲醇在磷酸溶液中，被高錳酸鉀氧化為甲醛，用偏重亞硫酸鈉除去過量的高錳酸鉀。甲醛在硫酸條件下與變色酸反應(yīng)生成藍紫色化合物。通過與甲醇對照液比較，對樣品中甲醇含量進行判定。

3 試劑和材料

方法中所用試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純，水為GB /T 6682規(guī)定的三級水。

3.1 試劑

3.1.1 高錳酸鉀（KMnO4）。

3.1.2 磷酸（H3PO4）。

3.1.3 偏重亞硫酸鈉（Na2S2O5）。

3.1.4 硫酸（H2SO4）。

3.1.5 變色酸鈉（C10H6Na2O8S2）。

3.1.6 乙醇（C2H6O）。

3.1.7 5%乙醇（體積分數(shù)）：吸取乙醇5 mL，置于100 mL容量瓶，加水稀釋至刻度。

3.1.8 高錳酸鉀-磷酸溶液（30 g/L）：稱取3.0 g高錳酸鉀，溶于100 mL磷酸-水（15+85）溶液。

3.1.9 偏重亞硫酸鈉溶液（100 g/L）：稱取10.0 g偏重亞硫酸鈉，溶于100 mL水。

3.1.10 變色酸顯色劑：稱取0.1 g變色酸鈉溶于25 mL水中，緩慢加入75 mL 硫酸，并用玻璃棒不斷攪拌，放冷至室溫。

3.2 參考物質(zhì)

甲醇參考物質(zhì)中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質(zhì)量見表1，純度≥99%。

表1 甲醇中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質(zhì)量

中文名稱	英文名稱	CAS登錄號	分子式	相對分子質(zhì)量
甲醇	Methanol	67-56-1	CH₃OH	32.04

3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 g/L）：稱取0.1 g（精確至0.001 g）甲醇參考物質(zhì)于100 mL容量瓶中，用5%乙醇稀釋至刻度，混勻。

3.4 材料

甲醇快速檢測試劑盒：適用基質(zhì)為白酒（酒精度18～68% vol），需在陰涼、干燥、避光條件下保存。

4 儀器和設(shè)備

4.1 電子天平：感量0.001 g。

4.2 量筒：50 mL，100 mL。

4.3 移液器：1 mL，5 mL。

4.4 酒精計：分度值為1% vol。

4.5 渦旋振蕩器。

4.6 水浴鍋。

4.7 環(huán)境溫度：10℃～30℃。

5 分析步驟

5.1 待測液制備

5.1.1 酒精度的測定：取潔凈、干燥的100 mL量筒，注入100 mL樣品，靜置數(shù)分鐘，待酒中氣泡消失后，放入潔凈、擦干的酒精計，輕輕按一下，不應(yīng)接觸量筒，平衡約5 min，水平觀測，讀取與彎月面相切處的刻度示值。

5.1.2 樣品稀釋：根據(jù)酒精計示值吸取對應(yīng)體積的樣品，置于10 mL比色管中，補水至10 mL（參見表2），混勻。

表2 不同酒精度樣品吸取體積表

酒精計示值 (% vol)	樣品吸取體積 (mL)	補水體積 (mL)
18～22	2.5	7.5
23～27	2.0	8.0
28～32	1.7	8.3
33～36	1.5	8.5
37～41	1.3	8.7
42～45	1.2	8.8
46～53	1.0	9.0
54～60	0.9	9.1
61～68	0.8	9.2

5.1.3 顯色：吸取稀釋后的樣品溶液（5.1.2）1.0 mL，置于10 mL比色管中，加入高錳酸鉀-磷酸溶液0.5 mL，混勻，密塞，靜置15 min。加入0.3 mL偏重亞硫酸鈉溶液，混勻，使試液完全褪色。沿比色管壁緩慢加入5 mL變色酸顯色劑，密塞，混勻，置于70℃水浴中，顯色20 min后取出，迅速冷卻至室溫，即得待測液。每批測試應(yīng)吸取1 mL 5%乙醇同5.1.3“加入高錳酸鉀-磷酸溶液0.5 mL”起操作，隨行全試劑空白試驗。

5.2 甲醇對照液制備

根據(jù)待測樣品的分類（糧谷類或其他類），吸取對應(yīng)體積（參見表3）的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.3），置于10 mL比色管中，補5%乙醇至10 mL，混勻。吸取上述溶液1.0 mL，置于10 mL比色管中，同5.1.3“加入高錳酸鉀-磷酸溶液0.5 mL”起操作，制得甲醇對照液。

表3 標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取體積表

待測樣品分類	標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取體積(mL)
糧谷類	0.3
其他類	1.0

5.3 判讀

將待測液（5.1）與甲醇對照液（5.2）進行目視比色，10 min內(nèi)判讀結(jié)果。應(yīng)進行平行試驗，且兩次判讀結(jié)果應(yīng)一致。

6 結(jié)果判定要求

觀察待測液顏色，與甲醇對照液比較判讀樣品中甲醇的含量。顏色深于對照液者為陽性，淺于對照液者為陰性。為盡量避免出現(xiàn)假陰性結(jié)果，判讀時遵循就高不就低的原則。

7 性能指標(biāo)

7.1 檢測限

0.4 g/L （以100%酒精度計）。

7.2 判定限

糧谷類：0.6 g/L （以100%酒精度計）；其他類：2.0 g/L （以100%酒精度計）。

7.3 靈敏度

≥95%。

7.4 特異性

≥85%。

7.5 假陰性率

≤5%。

7.6 假陽性率

≤15%。

注：性能指標(biāo)計算方法見附錄A。

8 其他

本方法所述試劑及操作步驟等是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不作限定。方法使用者在使用替代試劑或操作步驟前，須對其進行考察，應(yīng)滿足本方法規(guī)定的各項性能指標(biāo)。

本方法的參比方法為GB 5009.266《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中甲醇的測定》。

為減少乙醇量對顯色的干擾，本方法中待測液和對照液的乙醇量為5%。

本方法中采用的高錳酸鉀-磷酸溶液（3.1.8）、變色酸顯色劑（3.1.10）久置會變色失效，建議方法使用者考察穩(wěn)定性或臨用新配。

采用本方法，酒精度為非整數(shù)的樣品，為避免出現(xiàn)假陰性結(jié)果，建議參照表2吸取酒精度整數(shù)部分對應(yīng)體積。

當(dāng)目視不能判定顏色深淺時，可采用分光光度計測定待測液與甲醇對照液570 nm處的吸光度進行比較判定。

第二法乙酰丙酮法

9 原理

樣品中的甲醇在磷酸溶液中，被高錳酸鉀氧化為甲醛，用草酸除去過量的高錳酸鉀。甲醛在過量銨鹽條件下與乙酰丙酮反應(yīng)生成黃色化合物。通過與甲醇對照液比較，對樣品中甲醇含量進行判定。

10 試劑和材料

方法中所用試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純，水為GB /T 6682規(guī)定的三級水。

10.1 試劑

10.1.1 高錳酸鉀-磷酸溶液：同3.1.8。

10.1.2 草酸：無水草酸（H2C2O4）或含2分子結(jié)晶水的草酸（H2C2O4·2H2O）。

10.1.3 乙酰丙酮（C5H8O2）。

10.1.4 乙酸銨（C2H7O2N）。

10.1.5 冰乙酸（C2H4O2）。

10.1.6 50%乙醇（體積分數(shù)）：量取乙醇（3.1.6）50 mL，置于100 mL容量瓶，加水稀釋至刻度。

10.1.7 草酸溶液（50 g/L）：稱取5.0 g無水草酸或7.0 g含2分子結(jié)晶水的草酸，溶于100 mL水。

10.1.8 乙酰丙酮溶液：稱取乙酸銨25.0 g，加水70 mL使溶解，加冰乙酸3 mL及乙酰丙酮0.25 mL，加水稀釋至100 mL，用力搖勻。臨用現(xiàn)配。

10.2 參考物質(zhì)

同3.2。

10.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 g/L）：稱取0.1 g（精確至0.001g）甲醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于100 mL容量瓶中，用50%乙醇稀釋至刻度，混勻。

10.4 材料

甲醇快速檢測試劑盒：適用基質(zhì)為白酒（酒精度34% vol～68% vol），需在陰涼、干燥、避光條件下保存。

11 儀器和設(shè)備

同4。

12 分析步驟

12.1 待測液制備

12.1.1 酒精度的測定：同5.1.1。

12.1.2 顯色：根據(jù)酒精計示值吸取對應(yīng)體積的樣品，置于10 mL比色管中，補乙醇和水至2.0 mL（參見表4），混勻。加入高錳酸鉀-磷酸溶液1.0 mL，混勻，密塞，靜置30 min。加入草酸溶液1.0 mL，混勻，密塞，置沸水浴中使其褪色，取出冷卻至室溫。加入乙酰丙酮溶液2.0 mL，混勻，密塞，置沸水浴中，顯色30 min后取出，迅速冷卻至室溫，即得待測液。每批測試應(yīng)吸取2 mL 50%乙醇同12.1.2“加入高錳酸鉀-磷酸溶液1.0 mL”起操作，隨行全試劑空白試驗。

表4 不同酒精度樣品吸取體積表

酒精計示值 (% vol)	樣品吸取體積(mL)	補乙醇體積 (mL)	補水體積 (mL)
34～35	1.5	0.5	0.0
36～40	1.3	0.5	0.2
41～44	1.2	0.5	0.3
45～52	1.0	0.5	0.5
53～58	0.9	0.5	0.6
59～65	0.8	0.5	0.7
66～68	0.7	0.5	0.8

12.2 甲醇對照液制備

根據(jù)待測樣品的分類（糧谷類或其他類），吸取對應(yīng)體積（參見表5）的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.3），補50%乙醇至2.0 mL，混勻后同12.1.2“加入高錳酸鉀-磷酸溶液1.0 mL”起操作，制得甲醇對照液。

表5 標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取體積表

待測樣品分類	標(biāo)準(zhǔn)溶液吸取體積(mL)
糧谷類	0.6
其他類	2.0

12.3 判讀

將待測液（12.1）與甲醇對照液（12.2）進行目視比色，10 min內(nèi)判讀結(jié)果。應(yīng)進行平行試驗，且兩次判讀結(jié)果應(yīng)一致。

13 結(jié)果判定要求

同6。

14 性能指標(biāo)

14.1 檢測限

0.6 g/L （以100%酒精度計）。

14.2 判定限

糧谷類：0.6 g/L （以100%酒精度計）；其他類：2.0 g/L （以100%酒精度計）。

14.3 靈敏度

≥95%。

14.4 特異性

≥85%。

14.5 假陰性率

≤5%。

14.6 假陽性率

≤15%。

注：性能指標(biāo)計算方法見附錄A。

15 其他

本方法的參比方法為GB 5009.266《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中甲醇的測定》。

為減少乙醇量對顯色的干擾，本方法中待測液和對照液的乙醇量為50%。

采用本方法，酒精度為非整數(shù)的樣品，為避免出現(xiàn)假陰性結(jié)果，建議參照表4吸取酒精度整數(shù)部分對應(yīng)體積。

當(dāng)目視不能判定顏色深淺時，可采用分光光度計測定待測液與甲醇對照液415 nm處的吸光度進行比較判定。

附錄A

性能指標(biāo)計算表

樣品情況^a	檢測結(jié)果^b		總數(shù)
	陽性	陰性
陽性	N11	N12	N1.=N11+N12
陰性	N21	N22	N2.=N21+N22
總數(shù)	N.1=N11+N21	N.2=N12+N22	N=N1.+N2.或N.1+N.2
顯著性差異（c²）	c²=（\|N12-N21\|-1）²/（N12+N21），自由度（df）=1
靈敏度（p+，%）	p+=N11/N1.
特異性（p-，%）	p-=N22/N2.
假陰性率（pf-，%）	pf-=N12/N1.=100-靈敏度
假陽性率（pf+，%）	pf+=N21/N2.=100-特異性
相對準(zhǔn)確度，%^c	（N11+N22）/(N1.+N2.)
注： 1、由參比方法檢驗得到的結(jié)果或者樣品中實際的公議值結(jié)果。 2、由待確認方法檢驗得到的結(jié)果。靈敏度的計算使用確認后的結(jié)果。 N：任何特定單元的結(jié)果數(shù)，第一個下標(biāo)指行，第二個下標(biāo)指列。例如：N11表示第一行，第一列，N1.表示所有的第一行，N.2表示所有的第二列；N12表示第一行，第二列。 3、為方法的檢測結(jié)果相對準(zhǔn)確性的結(jié)果，與一致性分析和濃度檢測趨勢情況綜合評價。